受精

试管婴儿中受精是在体外完成的,所以IVF在日本也称为体外受精。

卵子受精后就成为具有生命力的受精卵,通过细胞的快速分裂,开始了胚胎发育过程。

 


第一步:对取出的卵子进行形态观测 

卵子级别是刚刚取出卵子时从形态上观测的结果,按卵母细胞的外围颗粒膜细胞的丰富程度分为G1到G3。

G1:最佳,卵母细胞外围的颗粒膜细胞非常饱满

G2:其次,卵母细胞外围的颗粒膜细胞较饱满

G3:较差,卵母细胞外围的颗粒膜细胞稀疏,未成熟可能性高

D:变异卵,不能使用

卵子质量.png

 


第二步:剥离颗粒膜细胞,判定卵子成熟度

培养的第一步,就是剥离卵子的外部颗粒膜细胞,留下卵母细胞。根据卵母细胞的成熟度,即是否开始减数分裂排出第一极体,分为GV,MI,M2三种:

GV卵:GV期的卵母细胞没有恢复减数分裂,将颗粒膜细胞去掉后可以看到明显的核。自然排卵状态下月经第八天卵子即开始长成到GV期。GV卵在正常IVF培养中不能使用,只能用于四代试管胞浆置换等操作。

MI卵:M1期是第一次减数分裂中期的卵母细胞,没有排出第一极体,颗粒细胞也扩散的不好。

MII卵:M2期卵母细胞是第二次减数分裂中期的卵母细胞,已经排出第一极体。只有M2卵属于成熟卵,可以和精子结合,排出第二极体,成为受精卵。

 


第三步:选择受精方式,进行受精操作 

根据精子情况不同,我们采用体外受精(自然受精)、显微受精(ICSI)和结合法。

1、自然受精(一代试管):在日本称为“体外受精”,在卵子周围是精子浓度为10万个/ml的媒精液,精子优胜劣汰自行进入卵子,完成精卵结合的过程。

2、显微受精(二代试管):在冻精或者鲜精精子状况不好、曾经有过受精障碍、或者精液的观察结果不明显的情况下使用。

显微受精或称注射受精(ICSI, Intra-Cytoplasmic Sperm Injection),俗称二代试管婴儿技术,显微镜下观察精子的活动情况,选择最强壮健康的直接注射到卵子中,进行受精和孵化。

3、结合法是体外受精和显微受精两种方式的结合:把采集到的卵子,一部分进行自然受精,另一部分进行显微受精,或者在自然受精失败时,用显微受精作为补救。

在签署受精卵培养同意书时,患者可以选择自己倾向的受精方式,或选择由培养师决定。

Piezo-ICSI.png

——培养师在进行ICSI显微受精操作

 


第四步:受精卵分裂和培养 

受精成功的标志:

受精过程约需24小时。

当一个精子进入卵母细胞的透明带时,受精过程即开始。

到卵原核和精原核的染色体融合在一起时,能够看到两个原核(2PN)时,标志着受精过程的顺利完成。

随后受精卵开始快速的倍数分裂,在受精第二天分裂为四细胞,第五天和第六天会继续成长为囊胚

 


关于受精环节的常见问题:

Q:我今天取的卵都是G2,为什么还是不受精呢?

A:卵子的级别G2是刚刚取出后从形态上观测的结果,还没有开始培养,还不能真正反应卵子的质量和生长能力。从统计数据看,93%新取出的卵子都是G2,G2卵有75%的概率能被受精。

 

Q:什么叫做“卵子不成熟,不能受精?”

A:剥离卵子外部颗粒膜细胞后,可以观察到卵子的成熟度。GV和M1都属于卵子不成熟的情况。GV卵不再使用,M1经过培养(即卵子前培养),还有机会长到M2。只有达到M2级的卵,才具备了受精的能力。因为试管婴儿是采用超促排(即比自然状态下多促一些卵),取出的卵平均有1/4是不成熟的,达不到受精要求。

 

Q:冻精好还是鲜精好呢?

A:因为精子冷冻技术已非常完善,冻精和鲜精的培养结果差别极小,我们一般建议两者皆可以,有条件的情况下优先使用鲜精。

 

Q:自然受精好还是显微受精好呢?

A:临床统计看,自然受精比显微受精的胚胎后期的流产率略低,但差别不明显,所以根据精子的情况,我们会优先使用自然受精。只有在使用冻精,或者鲜精精子状况不好、曾经有过受精障碍、或者精液的观察结果不明显的情况下使用显微受精。

 

Q:什么叫做 “卵子受精后不分裂” ?

A:在自然受精或显微受精情况下,最健壮的精子会自行进入或被注射到卵子中。正常情况下卵在受精后会开始裂变,首先分裂成两个原核。如果没有开始分裂,只有物理注入,受精卵就没有在继续生长,这种叫“受精卵不分裂”。

 

Q:什么叫做“受精卵异常分裂,单核或三核” ?

A:正常卵子受精后,在分裂初期会形成两个原核。如果出现单核1PN或者三核3PN,都属于分裂异常。如果是单核1PN,会继续培养,如果是三核3PN,属于异常受精卵,则培养终止。单核受精卵依然有3%的概率可正常发育为囊胚。